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保存温度：RT储存，未开封可保存24个月。
产品内容：
产品说明：
本试剂盒在酵母质粒小提试剂盒(KD2099)的基础上加以改进，增大了细胞处理量，优化了纯化步骤，节约了提取所用的时间，提高了质粒的产量和纯度。本品无需使用酚、氯仿等有毒有害试剂，整个实验操作可在1h内完成。快速提取的质粒样品量足以满足PCR扩增，以及转化大肠杆菌。
另外，此方法提取的DNA虽无蛋白和盐污染，但是会有部分基因组DNA污染，不能通过测吸光度值来定量，仅适用于PCR和大肠杆菌转化实验。
使用方法：
常规提取(需时60min)
一、裂解
1.用2mL的离心管分次离心收集酵母菌液4mL，12000rpm离心30 s，弃上清。
2.加入300μL A液悬浮酵母菌体，转移至1.5mL离心管中。加入约0.6g玻璃珠，涡旋震荡2min，再加入300μL B液，继续涡旋震荡1min。
3.置于-20℃冷冻10min或-80℃速冻1min，然后置于金属浴或水浴95℃解冻1min。
4.12000rpm室温离心3min。
二、DNA收集
1.吸取300μL的上清液至新离心管中，加入1mL C液(结合液)，震荡混匀；分两次上DNA吸附柱，
每次上柱后均先室温放置2min，然后12000rpm离心1min，倒掉穿透液。
2.在吸附柱中加入500μL D液(洗涤液)，12000rpm离心1min，弃穿透液。
3.再将吸附柱12000rpm离心30 s，甩干乙醇。
4.将吸附柱放入一个干净的1.5mL离心管中。在吸附柱中央加入50μL E液(洗脱液，需65～70℃预热)，室温静置2min。12000rpm离心2min。
5.穿透液即为酵母质粒DNA，可用于PCR、转化大肠杆菌等后续实验。
快速提取(需时30min)
一、裂解
1.用1.5～2mL的离心管离心收集酵母菌液1.5～2mL，12000rpm离心30 s，弃上清。
2.加入150μL A液悬浮酵母菌体，转移至1.5mL离心管中。加入约0.3g玻璃珠，涡旋震荡2min，然后再加入150μL B液，继续涡旋震荡1min。
3.将上述离心管置于-80℃速冻1min后，金属浴或者水浴加热解冻。
4.12000rpm室温离心3min。
二、DNA收集
1.吸取150μL的上清液至新离心管中，加入500μL C液(结合液)，震荡混匀后加入到DNA吸附柱中，然后12000rpm离心1min，倒掉穿透液。
2.在吸附柱中加入300μL D液(洗涤液)，12000rpm离心1min，弃穿透液。
3.再将吸附柱12000rpm离心30 s，甩干乙醇。
4.将吸附柱放入一个干净的1.5mL离心管中。在吸附柱中央加入50μL E液(洗脱液，需65～70℃预热)，室温静置2min。12000rpm离心2min。
5.穿透液即为酵母质粒DNA，可用于PCR、转化大肠杆菌等后续实验。
注意事项：
1.D液(洗涤液)含有乙醇，易挥发，用后请您及时拧紧盖子。
2.通常酵母质粒拷贝数较低，通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计很难检测到。
3.如仅需PCR检测，可选用本公司酵母阳性克隆快速检测试剂盒(SK2421)，无需提取步骤，可直接进行菌落PCR扩增。
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